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      CNVplex^®采用連接酶高特異性連接反應(yīng)對目的區(qū)域進(jìn)行雜交、連接，通過專利技術(shù)在連接探針末段引入不同長度的標(biāo)簽序列獲得長度各異的目的探針連接產(chǎn)物，利用熒光標(biāo)記的通用引物對連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過熒光毛細(xì)管電泳對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳分離檢測，最后通過對電泳圖譜的分析獲取各個位點(diǎn)的峰高，進(jìn)而對樣品目的區(qū)域的拷貝數(shù)進(jìn)行分析確定。
拷貝數(shù)計算：
1）輸出每個峰高數(shù)值（H值），如圖中H(T1), H(R), H(T2)
2）計算各個目標(biāo)區(qū)峰相對參照峰的比值（R值），如R(T1)= H(T1)/ H(R)
3）將檢測樣本的各個目標(biāo)區(qū)R值除以對照樣本的相應(yīng)目標(biāo)區(qū)R值（RR值）再乘以對照樣本該目標(biāo)區(qū)的拷貝數(shù)（通常為2）即獲得檢測樣本各個目標(biāo)區(qū)的拷貝數(shù), 如檢測樣本RR(T1)=0.5，但如果對照樣本RR(T1)=1，而T1在對照樣本中的拷貝數(shù)為2，則檢測樣本數(shù)T1的拷貝數(shù)=0.5/1×2=1
 
 
                                                                  圖1） CNVplex^TM原理圖
 
應(yīng)用領(lǐng)域：
       本方法適用于各個涉及到DNA拷貝數(shù)變異研究的遺傳研究領(lǐng)域，例如疾病基因組研究、腫瘤基因組研究、臨床分子診斷研究、植物基因組研究、動物基因組研究等。尤其適合針對較大候選區(qū)域、檢測密度要求較高的DNA拷貝數(shù)分析，以及全基因組CNV研究后進(jìn)行進(jìn)一步的大樣品驗證研究。