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針對(duì)目的個(gè)體在已知的DNA區(qū)段或者候選基因區(qū)域進(jìn)行序列測(cè)定，獲得區(qū)域的序列并尋找未知的突變或者多態(tài)。
技術(shù)方法：
針對(duì)目的片段進(jìn)行特異性擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)，利用引物對(duì)目的片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，后采用美國(guó)Life technologies公司的BigDye試劑盒對(duì)純化后的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行序列測(cè)定（見圖1）。該測(cè)序的基本原理是雙脫氧終止法，在測(cè)序反應(yīng)體系中含有四種dNTP以及一定比例的標(biāo)記不同熒光的四種ddNTP, 在測(cè)序聚合酶作用下，結(jié)合在PCR產(chǎn)物模板上的測(cè)序引物開始延伸，由于ddNTP的隨機(jī)摻入，不同PCR產(chǎn)物模板分子上的延伸反應(yīng)可隨機(jī)停留在整個(gè)序列的不同位置，這些由于3’端熒光ddNTP的摻入而帶上特定熒光的不同長(zhǎng)度延伸產(chǎn)物在ABI測(cè)序儀（3130XL, 3730XL）上經(jīng)毛細(xì)管電泳獲得分離，通過分析一系列長(zhǎng)度片段的熒光信號(hào)可以獲知目標(biāo)片段上的序列組成。  圖一：測(cè)序突變篩查原理圖。 應(yīng)用領(lǐng)域： 單基因多基因遺傳疾病的基因突變檢測(cè)、藥物代謝相關(guān)基因突變檢測(cè)、候選基因多態(tài)位點(diǎn)檢測(cè)及遺傳結(jié)構(gòu)分析、腫瘤相關(guān)基因的體細(xì)胞突變檢測(cè)、耐藥微生物菌株的突變檢測(cè)等
樣本要求：
不同來(lái)源的基因組DNA，可以來(lái)自血液、組織或各種病原微生物等。 服務(wù)內(nèi)容： 1、目標(biāo)基因序列查詢、特異引物設(shè)計(jì)、合成與優(yōu)化； 2、目的片段的擴(kuò)增、純化； 3、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序； 4、判讀測(cè)序結(jié)果，讀取突變或多態(tài)位點(diǎn)； 5、突變（SNP）位點(diǎn)數(shù)據(jù)整理、分析以及突變位點(diǎn)測(cè)序圖制作； 6、對(duì)于候選基因多態(tài)位點(diǎn)檢測(cè)項(xiàng)目，提供LD map分析、單倍型推斷以及tagSNP位點(diǎn)篩選。 服務(wù)時(shí)間： 通常情況下，<30樣本一個(gè)基因測(cè)序需15個(gè)工作日
檢測(cè)實(shí)例：
1.查找序列，標(biāo)注基因，待查位點(diǎn)，設(shè)計(jì)引物。  2.利用軟件對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析，在不同個(gè)體中尋找序列差異和突變位點(diǎn)。  3. 準(zhǔn)確提供篩查到的突變/SNP信息（非真實(shí)數(shù)據(jù)，僅供模式參考）  4. 可直接提供連鎖不平衡結(jié)構(gòu)分析圖 。 
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